白喉杆菌的微生物學診斷

　　臨床上疑似白喉的病人不必等待檢驗結果，應立即給予抗毒素和抗生素治療。但對于白喉流行期的首例病人應做微生物學檢驗予以證實。
　　
　　（一）直接染色鏡檢
　　
　　用棉拭采取假膜邊緣部滲出物，塗片，用奈瑟氏染色或美蘭染色，鏡檢有無含異染顆粒的棒狀杆菌。結合臨床症狀，可作出初步診斷。确診必須通過細菌培養并進行毒力試驗。
　　
　　（二）凝固血清棉拭培養法
　　
　　将沾有馬或牛血清的棉拭子放在無菌試管内，經8～10磅蒸氣滅菌20～30分鍾，并使血清凝固，且此凝固血清棉拭采取病人咽部标本，置37℃培養8～10小時後，直接塗片鏡檢。此法可作爲大量檢查時快速培養診斷之用。
　　
　　（三）培養檢查
　　
　　将棉試檢材接種于雞蛋斜面或Loeffer s血清凝固斜面培養基及亞碲酸鉀平闆培養基上，置37℃培養，待斜面或平闆上長出典型的灰色疑菌落，挑取轉種到雞蛋呀或血清斜面進行分離培養，以供進一步形态染色或毒力試驗鑒定。
　　
　　（四）毒力試驗
　　
　　1．豚鼠試驗 取體重250g 豚鼠2隻，其中一隻試驗前12小時，由腹腔注射白喉抗毒素250～500單位，供做對照。然後對照。然後各于皮射48小時的培養液2ml，若于2～4天注射抗毒素的豚鼠死亡，而對照豚鼠存活，便證明所試驗菌株爲有毒白喉杆菌。
　　
　　2．E平闆試驗将浸有白喉抗毒素的無菌濾紙條貼在含20%馬血清的瓊脂平闆上，然後沿濾紙條垂直方向劃線接種待測細菌，同時也接種已知産毒株和不産毒株做爲對照。37℃培養48小時後，若待檢菌株産生白喉外毒素，則在濾紙條和劃線生長的菌苔交界外出現白色沉澱線。