大腸癌的自殺基因治療

　　 腸癌是我國常見的惡性腫瘤之一，常用的手術、化療、放療等傳統的治療方式均未能使其療效得到明顯的提高。随着分子生物學及基因工程的發展，基因治療已成爲研究重點，其中自殺基因治療是一種較爲有效的具有臨床應用潛力的治療策略。它是把某些能将非毒物代謝成細胞毒性 藥物的非哺乳動物酶類合成的基因-自殺基因，經分子生物學途徑導入腫瘤細胞，使之在腫瘤細胞内特異地表達，該基因産物能将無毒的藥物前體代謝爲毒性産物，從而影響腫瘤細胞的DNA合成，引起細胞的死亡。目前用于治療大腸癌的自殺基因主要有HSV-tk基因和CD基因。本文就自殺基因治療大腸癌進行綜述。

　　一、 腫瘤的特異性靶向轉導

　　大腸癌的自殺基因治療包括：構建攜帶自殺基因的重組病毒載體；目的基因的轉導；藥物前體治療腫瘤細胞。爲了能使目的基因安全有效地整合到“靶細胞”中，目前構建病毒載體多包含有細胞專一性的基因表達調控元件，使自殺基因隻能在靶細胞中表達，而對周邊正常的組織細胞無傳染，從而保證了特異性的靶向轉導作用。蔣瓊等［1］構建了以CEA基因啓動控制的HSV-tk和EC-CD表達質粒pCEA-tk和pCEA-CD,然後分别與pSV2-neo共轉染結腸癌細胞株LoVo和宮頸癌細胞株Hela，與野生型LoVo細胞相比，LoVo/CEA-tk和LoVo/CEA-CD對GCV和5-FC的敏感性分别提高2 000倍和700倍，而Hela/CEA-tk(或Hela/CEA-CD)仍對GCV(或5-FC)不敏感，結果顯示了癌胚抗原(CEA)基因啓動子驅動自殺基因表達治療結腸癌的優越性。另外，目前采用in vivo法進行目的基因原位轉導［2］，即在瘤體内直接注射病毒上清液或包裝細胞直接接種入瘤體内。Hirschowitz等［3］在結腸癌動物模型的病竈中直接注射AdCMV/CD重組腺病毒上清液，經GCV處理後，發現病竈明顯縮小，與對照組相比，在第6天和第15天腫瘤體積分别縮小46%和74%,這充分說明了瘤體内基因轉導的有效性，in vivo法使自殺基因療法更利于臨床應用。

　　二、 旁觀者效應

　　1993年，Freeman［4］ 在轉導了HSV-tk基因的結腸癌細胞系HCT-116中觀察到GCV不僅對轉導基因的腫瘤細胞有殺傷作用，對于未轉導tk基因的腫瘤細胞也具有殺傷作用，這種現象稱爲“旁觀者效應”(bystander effect,BE)。

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