國外用于流腦流行病學調查的“指紋圖”有什麽優點如何制作
https://daz120.org 2005-12-08 11:28:07
關鍵詞:流腦
腦膜炎奈瑟氏菌的血清學分型可以歸納成兩種類型:一種是根據腦膜炎奈瑟氏菌染色體去氧核糖核酸限制性内切酶指紋圖,可以将其分成不同型;另一種是通過該菌的外膜蛋白和脂多糖的血清學分型。限制性内切酶去氧核糖核酸指紋圖比後者的分型方法更靈敏,重複性更好,對不同型和同型的菌株皆可區别。這種具有分子基因水平的指紋圖分型方法在菌株鑒别或流行病學調研上均具有重要意義。例如對流腦B群15型進行分型,該型菌株至少可以分成2至3個型的指紋圖。其中1型和2型指紋圖是侵襲性菌株模式的典型代表;3型可能屬于B15型的帶菌菌株。當比較1型和2型指紋圖時,可見2型圖中缺少一條大約是1.5千堿基對的帶。1型與2型指紋圖的相同處說明2個型來自同—祖先;不同之處則代表長期進化過程中所引起的變異。用亨特(H5nd)小和伊考(EcoR)I内切酶消化所形成的指紋圖,在培養基上傳幾十代後仍完全一樣,可以看出這種分型方法的穩定性。流行病學調查發現:同房間密切接觸患者的菌株具有完全相同的指紋圖;而其它房間末接觸現患者的帶菌者,從其咽部所分離到的菌株,與患者的指紋圖可以完全不一樣。采用“指紋圖”,可協助我們判别流行菌株及其變異,順藤摸瓜找出各菌株的流行特點和規律,尋找出始發病例和各地區各次流行間的内在聯系。
指紋圖的制作是先用蛋白水解酶将該菌裂解,用酚/氯法提取去氧核糖核酸,再用限制性内切酶亨特Ⅲ或伊考I消化去氧核糖核酸,通過聚丙烯酰胺凝膠電泳來分離去氧核糖核酸片斷,再用溴化乙錠染色,用紫外光照像以後,不同的基因指紋圖肉服就可看見。
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