丙肝及乙肝聯合基因免疫

        丙肝病毒是引起輸血後肝炎的主要原因，乙肝與丙肝傳播途徑相同，二者可重疊成混合感染，目前尚無滿意治療。本實驗應用雙表達載體進行了聯合基因免疫研究以尋找防治HCV／HBV重疊或混合感染的、新的高效聯合基因免疫策略。

        本實驗分别将與HCV核心區基因互補的CDNA和HBV核心區基因克隆于真核表達載體，構建pRSC－HBV／HCB，轉染小鼠骨髓瘤細胞（SP2／0），通過免疫熒光和Western印迹法檢測蛋白的表達，用酶聯免疫法、乳酸脫氫酶釋放法及荷瘤試驗觀察小鼠體液免疫應答及細胞免疫應答。

        實驗結果，pRSC－HBV／HCV轉染的SP2／0細胞可見HBcAg及HCV核蛋白染色陽性熒光細胞，相對分子質量1400及2100處均可見蛋白條帶，Western印迹分析可見特異性的蛋白條帶。10隻免疫鼠中全部出現抗－HCV及抗HBV抗體，而對照組（n＝10）全爲陰性。免疫組小鼠脾細胞對轉染pRSC－HBV／HCV的SP2／0細胞的細胞毒活性明顯高于對照組，荷瘤試驗顯示免疫組小鼠注射轉染pRSC－HBV／HCV的SP2／0細胞後腫瘤生長緩慢。

        慢性乙肝及丙肝患者體内病毒難以清除的原因之一是機體細胞免疫功能障礙，尤其是針對主要靶抗原即核抗原的特異性細胞免疫應答低下。本研究的結果提示pRSC－HBV／HCV在Ballb／c小鼠體内可同時獲得對HBV核蛋白與HCV核蛋白的特異性體液免疫應答及細胞免疫應答，從而爲聯合基因免疫提供了新的策略和思路。